摘要为评价新型纳米佐剂乳化抗原的免疫效果,本研究以FITC标记的卵清蛋白(FITC-OVA)为抗原,以新型纳米佐剂乳化制备OVA抗原(Nano-OVA),并将ISA 201佐剂乳化制备OVA抗原(201-OVA),抗原浓度均为100 μg/mL.将10 μL Nano-OVA和201-OVA分别加入小鼠骨髓源树突状细胞(DC2.4)中,2 h后收集细胞样品,利用流式细胞术检测各组DC2.4对OVA抗原的吞噬水平(FITC-OVA+%)及交叉递呈OVA抗原肽(SIINFEKL)水平(PE-25-D1.16+%).将DC2.4分别与5 μL Nano-OVA和201-OVA共孵育24 h后收集细胞样品,利用荧光定量PCR(qPCR)检测各组DC2.4共刺激分子CD86、细胞因子IL-12p40和IL-6 mRNA的转录水平.流式细胞术检测结果显示,与201-OVA组相比,Nano-OVA组DC2.4 FITC-OVA+%和PE-25-D1.16+%均极显著升高(P＜0.001),且均极显著高于对照组(P＜0.001).qPCR结果显示,Nano-OVA组DC2.4中IL-12p40 mRNA的转录水平极显著高于对照组(P＜0.01),显著高于201-OVA组(P＜0.05);Nano-OVA组DC2.4中CD86及IL-6 mRNA的转录水平极显著高于201-OVA和对照组(P＜0.01),但201-OVA组和对照组DC2.4中CD86、IL-12p40及IL-6 mRNA的转录水平均无显著差异(P＞0.05).将50 μL Nano-OVA和201-OVA分别通过足垫皮下免疫BALB/c小鼠,12 h后剖杀各组小鼠分离其腘窝淋巴结,制备冷冻切片,利用免疫组化试验检测各组FITC-OVA在小鼠腘窝淋巴结中的分布,并利用Image J软件量化各组小鼠腘窝淋巴结FITC-OVA平均荧光强度.免疫组化试验结果显示,与201-OVA组相比,Nano-OVA组小鼠腘窝淋巴结FITC-OVA荧光分布更广;荧光强度观察结果显示,Nano-OVA和201-OVA组小鼠腘窝淋巴结中FITC-OVA的平均荧光强度差异不显著(P＞0.05),但均显著强于对照组(P＜0.05).上述结果表明,Nano-OVA可更高效地被DC2.4吞噬、交叉递呈以及促进DC2.4的活化,诱导机体产生更强的免疫应答及靶向淋巴结的能力.本研究初步评估了新型纳米佐剂对DC的活化效果及其向小鼠淋巴结靶向引流FITC-OVA抗原的效果,为其临床应用提供参考依据.