摘要为探究禽腺病毒血清型4(FAdV-4)感染鸡胚心脏成纤维细胞(CEF)后调控该细胞中炎症因子反应的机制,本研究以MOI 5 FAdV-4贵州分离株(GZ-QL)感染鸡胚心脏CEF细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测FAdV-4感染后CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用western blot检测FAdV-4感染后CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;以40 μmol/L JAK/STAT信号通路抑制剂Ruxolitinib预处理CEF细胞2 h后,将FAdV-4按MOI 5感染CEF细胞,在感染后不同时间分别收集细胞和上清,采用western blot检测Ruxolitinib处理后FAdV-4感染的CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;采用qPCR检测Ruxolitinib处理后FAdV-4感染的CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用ELISA检测Ruxolitinib处理后FAdV-4感染的CEF细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平.结果显示,与不感染FAdV-4的空白对照细胞相比,FAdV-4感染CEF细胞后IL-6和IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),IL-1β基因的转录水平在后期显著上调(P<0.05),TNF-α基因的转录水平在前期无变化,后期极显著上调(P<0.01);western blot结果显示,与空白对照细胞相比,FAdV-4感染CEF细胞后p-JAK2蛋白的表达水平均极显著升高(P<0.01),且48 h p-JAK2蛋白的表达水平最高.Western blot结果显示,与FAdV-4感染组相比,Ruxolitinib处理后FAdV-4感染的CEF细胞及Ruxolitinib处理的CEF中p-JAK2蛋白的表达水平均极显著降低(P<0.01),Ruxolitinib组与空白对照组无显著差异;qPCR结果显示,与FAdV和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAdV-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),TNF-α基因的转录水平显著上调(P<0.05);ELISA结果显示,与FAdV和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAdV-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-8分泌水平极显著上调(P<0.01),TNF-α分泌水平显著上调(P<0.05)、IL-1β和IL-6分泌水平无显著变化,与转录水平结果基本一致.本研究上述结果首次证实FAdV-4可以诱导鸡胚心脏CEF细胞产生强烈的炎症反应,并激活了该CEF细胞中的JAK/STAT信号通路,该研究结果为深入阐明FAdV-4感染心脏细胞的致病机制提供一定的参考依据.