新疆南疆地区蜱蝇种类的鉴定与其携带的病原及遗传进化分析
Species identification,pathogen carriage and genetic evolution analysis of Melophagus ovinus in Southern Xinjiang
摘要为了解新疆南疆地区绵羊体外寄生虫蜱蝇(Melophagus)的种类及其携带的病原,本研究于新疆南疆共采集582只蜱蝇,其中昆玉市一牧场54只、皮山农场180只,克州阿克陶县348只.通过形态学和蜱蝇18S rRNA基因的PCR扩增鉴定蜱蝇种类及性别.通过PCR检测蜱蝇中的巴尔通体(Bartonella)rpoB及gltA基因;杀雄菌(Arsenophonus)、无形体(Anaplasma)、埃立克体(Ehrlichia)、沃尔巴克体(Wolbachia)的16S rRNA基因;立克次体(Rickettsia)的Omp A、17 ku及16S rRNA基因并测序,根据测序结果统计羊蜱蝇对上述病原的携带率.将测序结果经BLAST比对,分析与上述测序基因相似性最高的病原.采用邻接法构建巴尔通体rpoB、gltA基因及杀雄菌与沃尔巴克体16S rRNA基因的系统发育树,分析羊蜱蝇携带上述3种病原的种类.统计羊蜱蝇病原的携带率,并分析不同性别及地区对羊蜱蝇携带病原的影响.形态学及PCR鉴定结果显示,本实验采集的蜱蝇均为羊蜱蝇,其中雌性350只,雄性232只.PCR结果显示,羊蜱蝇中巴尔通体、杀雄菌和沃尔巴克体均为阳性,埃立克体、嗜吞噬细胞无形体、斑点热群立克次体均为阴性.经统计羊蜱蝇巴尔通体、杀雄菌及沃尔巴克体的携带率分别为100%(582/582)、39.9%(232/582)及70.9%(413/582),且有34.4%(200/582)的羊蜱蝇同时携带上述3种病原.BLAST比对及上述基因的遗传进化分析结果显示,羊蜱蝇携带的巴尔通体均为Bartonella melophagi;携带的杀雄菌均为内共生杀雄菌;携带的沃尔巴克体均为内共生沃尔巴克体.经统计雌性羊蜱蝇对杀雄菌的携带率高于雄性,雄性羊蜱蝇沃尔巴克体的携带率高于雌性;采样地点经纬度不同对羊蜱蝇携带的病原种类基本无影响,但随海拔升高,羊蜱蝇对这3种菌的共同携带率越高,且内共生杀雄菌及内共生沃尔巴克体均对羊蜱蝇的生殖起调控作用,推测高海拔不利于羊蜱蝇的生存.本实验全面分析了新疆南疆地区羊蜱蝇的种类及携带的病原,为新疆地区羊蜱蝇的防治提供参考依据.
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