摘要为研究rstA基因对肠炎沙门菌C50336生物学特性的影响,本研究利用λ-Red同源重组技术构建肠炎沙门菌 C50336(WT)rstA 基因缺失株 C50336△rstA(KO)、rstA 基因回补株 C50336△rstA/pBR322-rstA(RS),经 PCR 及测序鉴定正确后,测定培养9h期间各时间点各菌株OD600nm值,分析各菌株的生长特性,并利用半固体培养基检测各菌株的运动能力,结果显示3株菌的生长特性和运动能力均无明显差异.通过结晶紫染色法测定菌株生物被膜(BF)的形成能力,并利用刚果红培养基和荧光剂培养基分别检测BF中curli菌毛及纤维素的形成情况,结果显示,与WT、RS菌株相比,KO菌株BF的形成能力极显著降低(P＜0.01),rstA基因对菌毛形成无显著影响,但与BF中纤维素的形成有关.采用细菌计数法检测WT、KO、RS菌株在7种应激条件下的生存率,结果显示,除热应激条件下三者生存率无差异外,KO菌株在酸、碱、高渗、低渗、铁饥饿和氧化应激环境中的生存率较WT和RS菌株均极显著降低(P＜0.01).通过细菌计数法检测WT、KO、RS菌株对Caco-2细胞的黏附性、侵袭能力以及在巨噬细胞RAW264.7中的胞内存活能力,结果显示,3株菌对Caco-2细胞的黏附率均无显著差异;与WT、RS菌株相比,KO菌株的侵袭率极显著降低(P＜0.01),胞内存活率显著降低(P＜0.05).通过RT-qPCR检测肠炎沙门菌内18个毒力基因的相对转录水平,结果显示,相比于 WT、RS 菌株,KO 菌株的 ssaV、tatA、xthA、sipA、mrr1、ompR、sipB、orf245、hflk、pipB、invH、flgG、csgD共13个毒力基因的相对转录水平均极显著下调(P＜0.01).本研究首次证实了rstA基因参与肠炎沙门菌C50336 BF形成、抗应激、细胞侵袭、胞内存活以及毒力基因相对转录水平等机制,为沙门菌rstA基因的进一步研究提供参考.