摘要为明确苦参水提物对鸡柔嫩艾美耳球虫病的治疗效果及其作用机制,本实验将100只白羽肉鸡均分为4组,分别为阴性对照组(NC组)、虫体感染组(PC组)、虫体感染后苦参水提物治疗组(PC+SF组)及虫体感染后地克珠利治疗组(PC+DC组).除NC组外其余3组雏鸡在14日龄时均以4×104个/只口服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,PC+SF组和PC+DC组鸡感染后10d内每日口服相应药剂.在感染虫体第10d观察各组鸡临床症状,称量体重,记录死亡数,并计算抗球虫指数;对每组鸡剖检后取盲肠观察其剖检病变及组织病理变化.结果显示,除对照组外,其他3组鸡均出现体重增长缓慢,但两个治疗组后期体重得到恢复,且未出现死亡;PC+SF组鸡的抗球虫指数(ACI)为161.8,达到中效抗球虫病效果;PC组鸡盲肠出血、炎性细胞浸润、肠绒毛脱落,PC+SF与PC组相比盲肠组织炎性细胞浸润明显减少.收集各组鸡血清,利用ELISA检测各组鸡血清中促炎细胞因子白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素6(IL-6)的分泌水平;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组鸡盲肠组织中促炎细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素22(IL-22)及抑炎细胞因子白细胞介素10(IL-10)的转录水平;采用western blot检测各组鸡盲肠组织中NF-κB通路关键分子p65、p-p65、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)及磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IKBα)蛋白的表达水平.结果显示,与PC组相比,PC+SF组和PC+DC组鸡血清中促炎细胞因子IL-6的分泌水平均极显著降低(P<0.0001);qPCR结果显示,与PC组相比,PC+SF组和PC+DC组鸡盲肠组织中IFN-γ、IL-17及IL-22 mRNA的转录水平均极显著降低(P<0.0001),IL-10 mRNA的转录水平均极显著上调(P<0.0001);Western blot结果显示,与NC组相比,PC组鸡盲肠组织中NF-κB通路关键分子p65、p-p65、IκBα及p-IKBα蛋白表达水平均极显著升高(P<0.0001),而PC+SF组与PC组相比上述各蛋白的表达水平均极显著下降(P<0.0001),PC+DC组与NC组则无显著差异(P>0.05).综上所述,本研究结果首次证实苦参水提物通过抑制NF-κB通路炎症因子表达治疗鸡球虫病,为苦参应用于鸡球虫病的防治提供科学依据.
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