换一批摘要牛病毒性腹泻(BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(BVDV)引起的牛接触性传染病.为了解黑龙江省BVDV流行株及其分子特征,本研究对黑龙江省黑河市某规模化奶牛场21份鼻拭子样品.利用RT-PCR检测BVDV阳性样品.利用MDBK细胞对阳性样品进行分离培养及鉴定后,通过二代测序技术获得分离株全基因组序列,利用DNAMAN进行核苷酸相似性分析,利用MEGA 11软件包对分离株进行系统发育和分子进化分析,并绘制BVDV 5'UTR和全基因组序列进化树.利用BepiPred-2.0服务器预测BVDV E2蛋白的B细胞表位.将阳性样品在MDBK细胞中连续传6代,利用间接免疫荧光试验(IFA)检测病毒并采用电镜观察病毒粒子形态.结果显示,检测出4份BVDV阳性样品,且它们之间的5'UTR基因序列相同,为同一病毒株;IFA可以检测到病毒,电镜观察到具有典型BVDV形态特征的病毒粒子;5'UTR基因及全基因组遗传进化分析显示该分离株为BVDV-2b亚型;E2蛋白B细胞抗原表位分析显示,该分离株与BVDV SD1301株E2蛋白B细胞表位区域(aa150～aa180)高度相似,提示二者可能具有相似的致病性.以上结果表明,本研究分离到黑龙江地区首株BVDV-2b亚型,命名为HLJ-11株.研究明确了该规模化牛场内BVDV的遗传进化情况,为该地区BVD的防控奠定了实验基础.
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关键词
牛病毒性腹泻病毒分离鉴定全基因组测序遗传进化分析B细胞表位预测bovine viral diarrhea virusisolation and identificationwhole genome sequencinggenetic evolution analysisB-cell epitope prediction
分类号
S852.65
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1008-0589.202408016
发布时间
2025-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
黑龙江省自然科学基金项目（ZD2023C006）
黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目（YJSCX2023-Y30）
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