摘要为研究发酵鸡球虫散对海兰褐蛋鸡感染柔嫩艾美耳球虫的治疗作用,本实验选取90只健康雏鸡,随机分为6组,分别为Ⅰ对照组、Ⅱ感染组、Ⅲ益生菌组(植物乳杆菌菌液)、Ⅳ中药组(0.2％鸡球虫散)、Ⅴ发酵组(0.2％发酵鸡球虫散)和Ⅵ西药组(0.02％地克珠利),于8日龄时Ⅲ～Ⅵ组鸡分别饲喂基础日粮和相应药剂,16日龄时,除Ⅰ对照组外,其余各组雏鸡均灌胃感染球虫,其中发酵鸡球虫散为经植物乳杆菌发酵的经典方剂鸡球虫散.感染后每天观察各组雏鸡临床症状,记录并计算粪便中的球虫卵囊值.感染后9 d剖杀各组鸡,剖杀前8 h禁食并称重,采集血清、免疫器官和盲肠组织,计算各组鸡相对增重率、存活率、计算球虫卵囊值和抗球虫指数(ACI),以及器官指数.观察各组雏鸡盲肠组织形态学变化,利用ELISA试剂盒检测各组鸡血清中各类抗体、炎性因子及抗氧化指标,采用网络药理学分析中药复方成分治疗疾病的潜在关键靶点等,采用荧光定量PCR检测各组鸡盲肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB、p65、Occludin以及ZO-1基因相对转录水平的变化.结果显示,与I对照组相比,Ⅱ感染组鸡表现出明显的临床症状,精神委顿、嗜睡等,粪便检查可见鸡球虫卵囊,并伴随不同程度血便,剖检死亡鸡可见盲肠红肿;相对增重率、存活率、ACI均低于Ⅰ对照组;器官指数(脾脏、胸腺、法氏囊)均极显著降低(P＜0.01);盲肠组织绒毛不完整、断裂,绒毛高度/隐窝深度比值极显著性降低(P＜0.01);血清中IgA、IgM、IgG含量和IL-6、IFN-γ、TNF-α含量均极显著升高(P＜0.01),而CAT与SOD活性、GSH-Px与IL-10含量均极显著降低(P＜0.01),MDA含量极显著升高(P＜0.01);与Ⅱ感染组相比,以上指标在Ⅲ益生菌组、Ⅳ中药组、Ⅴ发酵组和Ⅵ西药组均得到不同程度缓解,其中V发酵组的缓解作用最为明显.经网络药理学分析发现,疾病与药物交集靶点38个,构建鸡球虫散-成分-球虫病-靶点网络图;蛋白互作网络图(PPI)分析到34个存在相互作用的蛋白质核心靶点;经GO与KEGG分析显示蛋白互作涉及20条相关通路,主要富集于免疫相关生物过程和炎症性肠病等通路.荧光定量PCR检测结果显示,与Ⅰ对照组相比,Ⅱ感染组盲肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB和p65的相对转录水平均极显著升高(P＜0.01),Occludin和ZO-1的相对转录水平极显著降低(P＜0.01).其他组上述指标均得到改善,尤其发酵组的改善最明显.上述结果首次证实植物乳杆菌发酵可显著提高鸡球虫散的综合药效,发酵鸡球虫散可能通过干预TLR4/MyD88/NF-κB信号传导途径,调控宿主炎症介质表达,提高蛋鸡抗球虫指数,缓解柔嫩艾美耳球虫感染导致的蛋鸡免疫器官损伤及氧化应激反应,同时促进肠黏膜的再生与修复.本研究为发酵鸡球虫散的临床应用提供了科学依据.