摘要为评估临床分离鉴定的一株猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)的生物学特性与免疫原性,本研究将该分离株FHV-1-S1病毒液以不同剂量(MOI 1、0.1、0.01、0.001、0.0001)感染猫肾细胞(CRFK),通过Reed-Muench法测定病毒TCID50,绘制病毒生长曲线,结果显示FHV-1-S1株在CRFK细胞中呈感染剂量依赖性增殖,其中MOI 0.001时病毒高效稳定增殖,病毒滴度可高达108.4 TCID50/mL.经PCR扩增获得FHV-1-S1株全长gC和gB基因,测序后核苷酸序列同源性分析结果显示,gC基因(1 836 bp)与国内外FHV-1流行株gC基因序列同源性为95.0％～100.0％,其中与大多数病毒株gC基因序列同源性达到100％,相比之下,与国外疫苗株(99.8％)及国内WH2020株(95.0％)gC基因序列同源性相对较低;gB基因(2 979 bp)与国内外FHV-1流行株gB基因序列高度同源(99.8％～99.9％),与犬、马、牛、猪、人其他物种疱疹病毒gB基因序列的同源性较低(32.2％～66.7％);遗传进化分析结果与核苷酸序列同源性分析结果相符;此外,氨基酸序列对比分析发现gC在aa77～aa103和aa159氨基酸突变频率较高,gB在aa499存在一个独特的苏氨酸(T)插入突变.致病性试验中,将FHV-1-S1株以106.0TCID50剂量滴鼻感染猫,设DMEM对照组,观察猫的临床症状并评分,采集各组猫眼鼻咽拭子,采用TCID50方法检测猫的排毒情况,14 d后剖杀观察各组猫各脏器的剖检病变并采用TCID50方法测定第三眼睑和肺脏病毒载量,结果显示感染猫出现咳嗽、打喷嚏、眼睑红肿、眼鼻分泌物等症状,临床评分峰值达15分,致死率达80％;观察期内持续排毒,与对照组相比实验组猫眼鼻咽拭子排毒量极显著升高(P＜0.001);剖检见第三眼睑和肺脏出现典型病变,且病毒载量均极显著或显著升高(P＜0.01、P＜0.05);对照组猫均无异常.免疫原性及攻毒保护试验中,将108.0 TCID50剂量的病毒液灭活后免疫猫(无佐剂),分别于一免及二免后21 d检测血清中和抗体效价,二免21 d后以106.0 TCID50剂量病毒液攻毒,同时设未免疫攻毒组与空白对照组,观察各组猫的临床症状并评分,同时利用TCID50方法监测各组猫的排毒和组织病毒载量,剖检后观察各脏器病变并进行组织病理学观察(HE),于死亡当天通过PCR检测FHV-1核酸,结果显示二免后21 d,免疫猫中和抗体效价达1∶45～1∶100;攻毒后免疫猫无明显临床症状,无死亡,临床症状评分基本为0;仅间歇性排毒,且眼鼻咽拭子排毒量与空白对照组均无显著差异;剖检猫各脏器均未见异常,第三眼睑和肺脏未检出活病毒;死亡当天猫拭子PCR检测呈阴性均无排毒;未免疫攻毒猫症状及指标与致病性试验猫的检测结果均一致,空白对照组猫均正常.本研究表明FHV-1-S1株兼具增殖滴度高、毒力强和免疫原性好的特点,可作为FHV-1灭活疫苗用候选病毒株.