人精胺/精眯N1-乙酰基转移酶单克隆抗体的制备及鉴定
Preparation and Identification of Monoclonal Antibody against Human Spermine/Spermidine N1-acetyltransferase
摘要目的 制备鼠抗人精胺/精眯N1-乙酰基转移酶(SSAT)单克隆抗体,分析该抗体的效价、抗原特异性及其在Western blot 和免疫组织化学等分析技术中的可用性.方法 在BL21 (DE3)中原核表达带6×His标签的SSAT重组蛋白,并用Ni-NTA树脂亲和层析纯化.用SSAT重组蛋白免疫Balb/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗SSAT单克隆抗体,所得抗体的特异性及效价用ELISA、Western blot及免疫组织化学技术检测.结果 成功建立了稳定分泌鼠抗人SSAT的单克隆抗体杂交瘤细胞株,该单克隆抗体可用于ELISA、Western blot、免疫组织化学、免疫荧光等分析技术.结论 成功制备SSAT单克隆抗体,为SSAT相关的分子和病理研究奠定了基础.
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