换一批星形胶质细胞条件培养液诱导骨髓基质细胞向神经元样细胞分化的神经营养机制探讨
Mechanism of Neuronal Differentiation of Bone Marrow Stromal Cells Induced by Astrocyte Conditional Medium
摘要目的 星形胶质细胞(AS)与Aβ1-40诱导凋亡的PC12细胞共育,观察其共育条件培养液诱导骨髓基质细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化的影响,探讨神经营养素家族蛋白[包括脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)、神经营养素3(NT-3)]是否参与了此过程.方法 PC12细胞分别经10 μg/mL Aβ1-40诱导不同时间点(0h、4h、6h、12h、24 h)后分为两部分,一部分应用流式细胞技术检测不同时间点PC12细胞凋亡率；另一部分与星形胶质细胞共育2d,收集各组条件培养液；各组条件培养液分为两部分,一部分应用ELASA法检测各组细胞条件培养液中的BDNF、NGF、NT-3蛋白含量；将另一部分各组细胞条件培养液对BMSCs进行诱导分化,免疫荧光检测BMSCs神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(nestin)蛋白表达和计数神经元样细胞分化比例.结果 在Aβ1-40作用6h时间点,PC12细胞凋亡率达高峰(P＜0.05)；与各组比较,与A31-40诱导6h后的PC12细胞共育2d后的星形胶质细胞条件培养液中(即C3组)的BDNF蛋白总量明显增高(A=1.87±0.43),具有统计学意义(P＜0.05),并且其诱导的BMSCs NSE(A=38.63±2.72)、nestin(A=43.53±5.63)表达和神经元样细胞分化比例(A=44.62±3.22)明显升高,与其他组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 星形胶质细胞与Aβ1-40诱导凋亡的PC12细胞共育后,星形胶质细胞共育条件培养液促进BMSCs向神经元样细胞分化,BDNF可能参与了这一过程.
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关键词
星形胶质细胞骨髓基质细胞分化脑源性神经营养因子神经生长因子神经营养素-3astrocytesbone marrow stromal cellsdifferentiatingbrain-derived neurotrophic factorBDNFneural growth factorneurotrophin-3
医学主题词
细胞(Cells)骨髓(Bone Marrow)细胞分化(Cell Differentiation)神经生长因子类(Nerve Growth Factors)脑源性神经营养因子(Brain-Derived Neurotrophic Factor)
分类号
R74（神经病学与精神病学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.0258-4646.2013.08.011
发布时间
2013-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
辽宁省博士科研启动基金（20091106）
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