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SUMO蛋白在体外培养的人晶状体上皮细胞内的表达及对氧化应激的调控作用

SUMO Expression and Regulation in Oxidative Stress in Cultured Human Lens Epithelial Cells

摘要目的:观察小泛素相关修饰物(SUMO)在体外正常培养的人晶状体上皮细胞系(SRA01/04)内的表达以及由高糖诱导的氧化应激条件下SUMO的变化,探讨其对氧化应激的调控作用。方法通过免疫细胞化学染色法,检测SUMO1,2/3,4蛋白在正常培养的SRA01/04内的表达及分布;通过RT?PCR法,观察不同浓度和时间高糖处理时SUMO 1~4 mRNA的表达变化。按浓度实验分组:葡萄糖浓度分别为5.5、12.5、25、50 mmol/L作用24 h。按时间实验分组:葡萄糖浓度50 mmol/L作用0、6、12、24 h。将GFP?SUMO2质粒转入细胞后通过CCK8检测法和AV/PI双染流式细胞仪检测高糖(50 mmol/L)处理后,转染与非转染组的细胞存活率和细胞凋亡率。结果免疫细胞化学染色结果,SUMO 1~4蛋白在SRA01/04细胞内主要分布于细胞核,SUMO 2/3同时少量分布于胞质;RT?PCR结果可见,与低糖组比较,高糖组随着糖浓度增加SUMO1~SUMO4 mRNA表达增加(P<0.05);与50 mmol/L高糖处理0 h比较,随着处理时间增加SUMO1~SUMO4 mRNA表达增加(P<0.05)。与非转染组比较,转染GFP?SUMO2的SRA01/04经高糖处理后存活率增加,凋亡率降低(P<0.05)。结论 SUMO蛋白在SRA01/04内阳性表达,一定程度高糖诱导的氧化应激影响SUMO mRNA表达。

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中国医科大学学报

中国医科大学学报

2015年3期

193-198页

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