神经肽P物质通过Ca2+和CREB诱导自然杀伤细胞的活化作用
The neuropeptide substance P activates natural killer cells through Ca2+ and CREB
摘要目的 体外研究神经肽P物质?(SP)?对自然杀伤?(NK)?细胞的活化作用,并探讨SP受体NK-1R在SP调控NK细胞活性中的作用及可能的信号分子机制.方法 采用MTT释放法检测SP对NK92-MI细胞增殖和杀伤活性的影响,荧光定量PCR和流式细胞术检测NK-1R的mRNA表达水平和膜表达,Fura-2/AM荧光探针法测定NK92-MI细胞胞质钙浓度,Western?blotting测定环磷酸腺苷?(cAMP)?反应元件结合蛋白?(CREB)?磷酸化水平.结果 10-12?mol/L?SP可促进NK92-MI细胞的增殖和杀伤活性,NK-1R拮抗剂可完全或大部分阻断SP的促进作用.10-12?mol/L?SP作用下,NK92-MI细胞的NK-1R表达上调,胞质钙浓度升高,提示SP通过增加NK-1R的表达及激活Ca2+信号通路发挥对NK92-MI细胞活性的调节作用.10-12?mol/L?SP使NK92-MI细胞CREB磷酸化水平明显增高,表明SP可诱导CREB在Ser133位点磷酸化而激活.结论 cAMP信号通路参与了NK-1R介导的SP对NK92-MI细胞的活化作用,且Ca2+和CREB是关键信号分子.
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