定量5-羟奥美拉唑和奥美拉唑砜以探测中国人肝微粒体中CYP2C19和CYP3A4的活性

Probing CYP2C19 and CYP3A4 activities in Chinese liver microsomes by quantification of 5-hydroxyomeprazole and omeprazole suiphone

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摘要目的：建立同时定量5-羟奥美拉唑(5-OH-OP)和奥美拉唑砜(OPS)的分析方法，探讨奥美拉唑(OP)在中国人肝微粒体中能否作为细胞色素P450 2C19(CYP2C19)及3A4(CYP3A4)的活性表型探针药．方法：在中国人肝微粒体中进行OP的体外代谢，以高压液相色谱法(HPLC)检测主要代谢产物5-OH-OP及OPS；抗CYP2C8／9／19及抗CYP3A4的单克隆抗体被用于抑制实验；以Western斑点法和光密度扫描定量肝微粒体中CYP2C19及CYP3A4的含量．结果：在HPLC分析中5-OH-OP及OPS有很好的洗脱，二者检测限均为0．0l nmol，回收率为98％-102％并且变异系数小于9．5％；抗CYP2C8／9／19及抗CYP3A4均对5-OH-OP的生成有显著的抑制作用(P<0．05)，二者的抑制作用呈底物浓度依赖，并且抗CYP3A4几乎可单独去除OPS的生成(>87％)；在底物浓度为2 μmol／L OP时，中国人肝微粒体中OP的5-羟化与美芬妥英的4＇-羟化活性之间(r=0．72，P<0．01)、OP的5-羟化活性与CYP2C19含量之间(r=0．82，P<0．01)以及OP的硫代氧化活性与CYP3A4含量之间(r=0．78，P<0．01)均有很好的相关性．结论：中国人肝微粒体中OP的代谢主要由CYP2C19和CYP3A4介导；采用本研究建立的HPLC方法，在适当的底物浓度下，OP能用于体外探测中国人肝微粒体中CYP2C19及CYP3A4的活性．