换一批siRNA介导hPOT1基因表达抑制对HeLa细胞Caspase-3的影响
Effect of inhibition of hPOT1 expression mediated by siRNA on Caspase-3 in HeLa cells
摘要目的应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,特异地抑制端粒保护蛋白POT1基因在HeLa细胞中的表达,并观察其对细胞Caspase-3活化的影响.方法利用作者课题组先前构建的含hPOT1基因特异性序列(hsDNA)的3种重组siRNA表达质粒(pmU6-shRNA1、pmU6-shRNA2和pmU6-shRNA3),由脂质体介导转染HeLa细胞,以RT-PCR和EMSA法检测转染细胞中的hPOT1基因的表达抑制效果,并通过RT-PCR、Western blot和Caspase-3检测试剂盒分析Caspase-3表达和活化.结果 3种pmU6-shRNA重组质粒转染HeLa细胞48 h后,细胞中hPOT1基因mRNA和蛋白质表达水平均降低,Caspase-3 mRNA表达水平基本无变化,Caspase-3 酶原水平降低,而Caspase-3 酶活性增高.结论 siRNA表达载体介导的RNAi能有效地抑制HeLa细胞中hPOT1基因表达,hPOT1基因表达的抑制导致细胞Caspase-3活化.
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分类号
R329.24（基础医学人体形态学）R329.25（基础医学人体形态学）R342.22（人体生物化学、分子生物学）R342.3（人体生物化学、分子生物学）R345.79（人体生物化学、分子生物学）R394.2（医学遗传学）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1001-1978.2006.02.015
发布时间
2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省博士启动基金（0401397）
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