换一批
换一批从放线菌发酵液中高通量筛选端粒酶抑制剂
High-throughput screening of telomerase inhibitors in actinomycetes fermentation broth
摘要目的 从2 000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂.方法 经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选.将酵母菌液移于96孔板,加入待测样品,振摇培养并定时经多功能微孔板分析仪进行定量分析,选取抑菌率大于0.45的样品进行复筛.结果 经验证所持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型均可用于下一步的筛选,并选取酵母菌液OD_(595nm) 0.04做为起始筛选浓度,选取放线菌发酵液剂量为5 ml,通过对放线菌发酵液进行初筛和复筛,发现了14株放线菌发酵液的抑菌效率超过0.45.结论 该研究首次高通量筛选端粒酶抑制剂,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到14株放线菌发酵液可能具有抗肿瘤活性,为进一步研究和开发抗肿瘤新药奠定基础.
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