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人乳腺癌细胞株MCF-7及其紫杉醇耐药株中紫杉醇结合的差异蛋白质分析

Analysis of the differential binding protein in human breast cancer cell line(MCF-7) and paclitaxel resistant cell line(MCF-7/Taxol)

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摘要目的分析人乳腺癌细胞株MCF-7及其紫杉醇耐药株MCF-7/Taxol中的紫杉醇结合的差异蛋白质,探索抗肿瘤药物新靶点.方法合成生物素化紫杉醇,HPLC-MS联用法检测合成产物.SRB法检测生物素化紫杉醇的生物活性,免疫磁珠偶联后与MCF-7及其MCF-7/Taxol的全细胞蛋白液反应,获得紫杉醇结合蛋白,SDS-PAGE电泳获得差异蛋白条带,LC-MS/MS分析,Western blot鉴定差异结合蛋白.结果成功合成生物素化紫杉醇,生物素化紫杉醇的生物活性和紫杉醇相当.经过蛋白电泳分析,MCF-7/Taxol的紫杉醇结合蛋白较MCF-7多一差异条带,LC-MS/MS分析提示数个目标蛋白,经过Western blot验证差异条带中有Heat shock protein HSP 90、Dermcidin Precursor、Actinin.结论成功获得了MCF-7和MCF-7/Taxol之间的紫杉醇细胞差异结合蛋白,对这些蛋白作用机制的的深入探索,可能为抗肿瘤药物的研究寻找到新的靶点蛋白,发现新的肿瘤耐药机制.

作者张正华 ^[1] 梁晓华 ^[2] 吴学勇 ^[3] 侯凯生 ^[3] 张小平 ^[4] 吕中伟 ^[4] 学术成果认领

作者单位复旦大学华山医院肿瘤科,复旦大学上海医学院,上海,200040;上海市静安区中心医院肿瘤科,上海,200040 ^[1] 复旦大学华山医院肿瘤科,复旦大学上海医学院,上海,200040 ^[2] 上海市静安区中心医院肿瘤科,上海,200040 ^[3] 同济大学附属第十人民医院核医学科,上海,200072 ^[4]

关键词人类乳腺癌紫杉醇多药耐药差异蛋白 HSP90 human breast cancer paclitaxel multidrug resistance differential protein HSP90

医学主题词蛋白(Egg White)细胞(Cells)乳腺, 人(Mammary Glands, Human)癌(Carcinoma)人类(Humans)

分类号 R282.71（中药学）R329.24（基础医学人体形态学）R329.28（基础医学人体形态学）R363-332（病理学）R737.902.2（泌尿生殖器肿瘤）

栏目名称

论著

发布时间 2010-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（30300092）