ABCA1、ACAT1DNA甲基化在Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中作用研究
Effects of Hcy on cholesterol efflux of THP-1 monocyte-derived foam cells and mechanism of ABCA1 and ACAT1 DNA methylation regulation
摘要目的 探讨ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中的作用.方法 复制泡沫细胞模型,用50、100、200、500 μmol·L-1 Hcy和100 μmol·L-1 Hcy+叶酸+维生素B12(100+F+V)干预,并设对照组(0 μmol·L-1 Hcy).油红O染色观察泡沫细胞形成,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测ABCA1、ACAT1 DNA甲基化水平,并分析两者比值变化;ELISA-like法检测DNA甲基转移酶(DNMTs)活性;化学比色法分析细胞内胆固醇含量.结果 成功复制了泡沫细胞模型;给予不同浓度Hcy刺激后,ABCA1 DNA甲基化改变呈上升趋势,ACAT1 DNA甲基化改变呈下降趋势,给予100+F+V干预后可逆转上述变化,其中ABCA1 DNA甲基化改变更明显;同时,不同浓度Hcy可使泡沫细胞内DNMTs活性和胆固醇含量增加.结论 ABCA1和ACAT1 DNA甲基化的改变参与了Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出,DNMTs可能起关键调控作用.
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