换一批香烟提取物对血栓调节蛋白与凝血酶结合力的影响
Effect of cigarette smoke extract on the interaction between thrombomodulin and thrombin by live-cell single-molecule force spectroscopy
摘要目的：利用单分子力谱法检测香烟提取物( cigarette smoke extract, CSE)对血栓调节蛋白( thrombomodulin, TM)与凝血酶间单分子水平相互作用,探讨吸烟致血管内血栓形成机制。方法构建TM-GFP质粒并转染至COS-7细胞,应用原子力显微镜( atomic force microscope, AFM)分组测力：(1)空白质粒对照组(GFP-Thr)；(2)TM-Thr对照组；(3)5%CSE孵育TM-Thr细胞组(CSE-TM-Thr)；(4)5%CSE孵育空白质粒细胞组(CSE-GFP-Thr)。结果(1)TM与凝血酶的相互作用力为(60．90±0．82) pN,成键几率为(22．58±3．95)%,抗体阻断后成键几率为(2．58±2．0)%。(2)与TM-Thr 组比较, GFP-Thr 组、CSE-TM-Thr 组、CSE-GFP-Thr组,3组AFM成键几率明显减低,P<0．05；但3组间两两比较差异无统计学意义。在定量TM修饰的硅片表面检测证实CSE同样可减少TM与凝血酶的成键几率。结论吸烟可能通过减少TM与凝血酶结合几率,抑制TM的抗凝作用,从而导致血管内血栓形成。
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关键词
香烟提取物血栓调节蛋白单分子作用力原子力显微镜凝血酶人脐静脉内皮细胞cigarette smoke extractthrombomodulinsingle-molecule force spectroscopyAFMthrombinhuman umbilical vein endothelial cells
医学主题词
凝血酶(Thrombin)血栓调节蛋白(Thrombomodulin)显微镜检查, 原子力(Microscopy, Atomic Force)人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells)吸烟(Smoking)
分类号
R163（个人卫生）R322.123（基础医学人体形态学）R329.24（基础医学人体形态学）R364.15（病理学）R543（心脏、血管《循环系》疾病）R977.3（药品）R977.6（药品）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-1978.2014.04.020
发布时间
2014-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81370315）
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