葫芦素E抑制HeLa细胞mTORC1的活性并诱导细胞自噬
Cucurbitacin E induces autophagy in HeLa cells by inhibiting mTORC1 activity
摘要目的:研究葫芦素E诱导HeLa细胞发生细胞自噬的作用机制。方法改良MTT法测定葫芦素E对HeLa细胞增殖的影响,免疫印迹法检测mTORC1下游信号蛋白的磷酸化以及自噬相关蛋白的表达。结果葫芦素 E对 HeLa细胞增殖有剂量依赖性抑制作用,其24 h 的 IC50为4.01μmol·L-1。通过对mTORC1底物磷酸化水平的检测发现,葫芦素E对p70S6K的磷酸化(活化)作用有明显的剂量和时间依赖性抑制作用。同时,葫芦素E增加自噬小体标志物LC3-Ⅱ的表达,氯喹能进一步提高其水平;葫芦素E还能降低p62/SQSTM1的水平,表明诱导了完整的细胞自噬过程。细胞自噬的诱导与mTORC1下游底物ULK1 S757磷酸化水平的下降有正相关性。结论葫芦素 E 可能通过抑制mTORC1活性而诱导细胞发生自噬作用。
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