双团棘胸蛙皮肤胸腺肽-β4的基因克隆及活性检测
Gene cloning and bioactive analysis of thymosin-β4 from skin of Nanorana yunnanensis
摘要目的:研究双团棘胸蛙( Nanorana yunnanensis)皮肤胸腺肽-β4的基因和促进血管生成作用。方法通过基因扩增的方法克隆出双团棘胸蛙的2个皮肤胸腺肽-β4( pTβ4-1和pTβ4-2)的cDNA;根据推导蛋白序列合成多肽在鸡胚尿囊膜和内皮细胞实验系统进行血管生成活性分析。结果 pTβ4-1和pTβ4-2的cDNA长度分别为662 bp和673 bp,开放阅读框都为135 bp,编码44个氨基酸残基。成熟蛋白拥有四足动物胸腺肽β4的典型特征。 pTβ4-1和pTβ4-2的cDNA序列及成熟蛋白与来源于人类、家鼠、家鸡、爪蟾、斑马鱼、大比目鱼和棕点湍蛙的胸腺肽-β4高度相似;合成的 pTβ4-1和pTβ4-2都能促进鸡胚尿囊膜血管生长和内皮细胞小管形成。结论双团棘胸蛙皮肤含有两个具有促血管生成的胸腺肽-β4。
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