99mTc-MIBI评价2-脱氧-D-葡萄糖对鼻咽癌耐药株多药耐药的逆转作用及机制
Evaluation of reversal effect of 2-DG on multidrug resistance by detecting uptake of 99mTc-MIBI in HNE-1/DDP cells
摘要目的:探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)对鼻咽癌顺铂耐药株细胞( HNE-1/DDP )多药耐药( MDR )的逆转机制,观察99m锝-甲氧基异丁基异腈(99m technetium-methoxyisobutyli-sonitrile,99m Tc-MIBI)细胞内的摄取变化,评价2-DG逆转肿瘤细胞多药耐药的效果。方法γ计数器检测不同浓度2-DG作用下HNE-1/DDP细胞对99m Tc-MIBI的摄取清除情况以及2-DG浓度为10 mmol·L-1时HNE-1及HNE-1/DDP细胞对99m Tc-MIBI的摄取清除情况。测定2-DG 作用下HNE-1/DDP细胞内ATP值。 Western blot检测2-DG作用下HNE-1/DDP细胞内P糖蛋白( P-gp)、多药耐药相关蛋白( MRP)表达。溴化丙啶( PI)单染检测顺铂( DDP)单独及联合2-DG作用下HNE-1/DDP细胞的凋亡情况。结果 HNE-1/DDP细胞对99m Tc-MIBI的清除率为54.8%,高于HNE-1细胞的清除率-41.3%(P <0.01),2-DG(10 mmol·L-1)作用后HNE-1/DDP细胞的清除率为-203.7%,较前明显降低( P<0.01)。 HNE-1/DDP细胞在2-DG作用下 ATP值为对照组的55.69%,且P-gp、MRP蛋白表达较对照组减少。 DDP联合2-DG(10 mmol·L-1)作用24 h后HNE-1/DDP细胞凋亡率为49.4%,高于单独使用DDP时HNE-1/DDP细胞的凋亡率(22.5%)。结论99m Tc-MIBI可有效检测HNE-1/DDP细胞多药耐药现象及评价2-DG的逆转效果,2-DG逆转机制可能与细胞内ATP生成抑制及相关转运蛋白表达减少有关。
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