换一批基于人胚胎干细胞的实时细胞系统评价心脏毒性方法的建立
Establishment of the method to evaluate cardiac toxicity by real-time cell analysis system on human embryonic stem cells
摘要目的：采用人胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞(hu-man embryonic stem cells derived cardiomyocytes, hESC-CM)联合实时细胞分析系统(real- time cell analysis Cardio,RTCA Cardio),建立一种体外药物心脏毒性早期筛选方法。方法将 hESC-CM 接种到 RTCA Cardio E-Plate 96孔板,分析心肌细胞的搏动频率、幅度和搏动节律不规则性指数确定细胞最佳接种密度及检测时间,建立体外药物心脏毒性早期筛选方法。在此基础上,分别采用0.1% DMSO 作为溶剂对照及具有抗心律失常作用的药物奎尼丁(0．2、0．78、3．13、12．5、50和100μmol·L -1)作为阳性对照进行了验证。结果0．1% DMSO 对 hESC-CM 的生长指数(cell index,CI 值)、搏动特征图谱及搏动频率和幅度均无影响。而与溶剂对照组相比,奎尼丁浓度≥3．13μmol·L -1时影响细胞 CI 值和特征性搏动图谱,抑制细胞搏动频率和幅度,且具有浓度依赖性,浓度越高细胞搏动信号恢复所需时间越长,对搏动频率和幅度的抑制作用越明显。结论采用 hESC-CM 联合 RT-CA Cardio 系统建立的体外药物心脏毒性早期筛选方法可以检测出奎尼丁对心肌细胞搏动状况的影响,该方法可作为一种高通量筛选工具用于临床前药物心脏毒性早期筛选。
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-1978.2016.01.029
发布时间
2016-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
“十二五”国家科技部重大新药创制重大专项资助项目（(2012ZX09302002)）
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