VSVG/HIV-1 NL4-3 Luc假病毒筛选抗HIV-1药物的条件优化及应用
Optimization and application of VSVG/HIV-1 NL4-3 Luc system for screening of anti-HIV-1 compounds
摘要目的:建立并优化 VSVG/HIV-1 NL4-3 Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1 NL4-3 Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进一步验证了该模型的可行性与有效性。最后,应用该系统对特定靶点化合物进行筛选,并与HIV-1ⅢB病毒筛选体系所得结果进行比较。结果 VSVG/HIV-1 NL4-3 Luc对CRFK细胞的感染力最强,报告基因的表达水平与加入的病毒量呈剂量依赖关系。比较3种实验条件下不同阳性药物抑制VSVG/HIV-1 NL4-3 Luc的半数有效剂量浓度EC50,发现第3种条件最优。而用该假病毒对合成化合物进行筛选,发现其EC50与病毒HIV-1ⅢB所得EC50基本一致。结论成功建立并优化了基于VSVG/HIV-1 NL4-3 Luc假病毒的抗HIV药物筛选系统。
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