换一批小檗碱联合骨髓间充质干细胞对高糖损伤下血管内皮细胞能量代谢的影响
Effect of berberine combined with bone marrow mesenchymal stem cells on energy metabolism of HUVECs damaged by high glucose
摘要目的研究黄连的主要有效成分小檗碱联合骨髓间充质干细胞对于高糖作用下血管内皮细胞能量代谢的影响。方法① MTT法检测细胞增殖以及活性情况；②流式细胞术检测细胞周期；③彗尾法检测细胞 DNA 损伤情况；④HPLC测定细胞中ATP、ADP、AMP含量,能荷EC值；⑤ RT-PCR法测定CCR、COX mRNA表达；⑥ Western blot法检测COX、CCR的蛋白表达。结果①高糖干预损伤后的血管内皮细胞活性明显降低、增殖能力减弱,S+G2期的细胞数量明显减少,出现一定程度的DNA损伤,而小檗碱、骨髓间充质干细胞及其联合使用均能不同程度提高细胞活性和增殖能力,增加S+G2期的细胞数量,促进DNA的修复( P<0．01),且小檗碱联合干细胞组的效应优于单用组；②血管内皮细胞经高糖干预损伤后ATP和ADP含量减低、AMP含量增多、EC值明显降低,小檗碱、骨髓间充质干细胞及其联合使用均能提高ATP和ADP含量( P<0．01)；且小檗碱联合干细胞的效应优于单用组；③血管内皮细胞经高糖干预损伤后,COX、CCR mRNA和蛋白表达明显降低,经小檗碱、骨髓间充质干细胞及其联合使用干预后,CCR 、COX mRNA和蛋白表达明显升高( P<0．01或P<0．05),且小檗碱联合干细胞的上调作用最为明显。结论小檗碱、骨髓间充质干细胞以及两者联合使用对于高糖损伤后血管内皮细胞能量代谢的改善具有促进作用,其机制可能是小檗碱、骨髓间充质干细胞可上调COX和CCR mRNA和蛋白的表达,从而介导葡萄糖类氧化物的水解,改善血液环境,增加血管内皮细胞的葡萄糖供应和摄取,从而改善高糖损伤后血管内皮细胞的能量代谢。
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关键词
小檗碱骨髓间充质干细胞血管内皮细胞高糖损伤能量代谢细胞色素C氧化酶,细胞色素C还原酶berberinebone marrow mesenchymal stem cells ( BM-MSCs )vascular endothelial cellsdamage by high glucoseenergy metabolismcyto-chrome C oxidase ( COX )cytochrome C reductase ( CCR)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-1978.2016.11.020
发布时间
2016-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81573956,81273753）
湖南省高等学校科技创新团队支持计划（2015CXTD-4）
湖南省重点学科建设项目(十二五)（ZXJCXK201514）
湖南中医药大学中医经典理论与经方应用研究科技创新团队
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