摘要目的:探究内皮细胞中香草素受体4型瞬时感受器电位通道(TRPV4通道)与胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)在空间上的偶联作用。方法通过设定梯度盐(培养基中外源加入20、40、80、160 mol·L-1 NaCl)确定高盐处理内皮细胞的最适盐浓度;在细胞水平上,通过免疫荧光能量共振转移(im-muno-FRET)技术检测人微血管内皮细胞(HMEC)和小鼠胸主动脉原代内皮细胞中TRPV4与cPLA2的空间偶联作用;在动物组织水平,通过同样的技术检测正常小鼠与高盐诱导的高血压小鼠的胸主动脉血管环上的内皮细胞中TRPV4与cPLA2的空间偶联情况。结果高盐诱导内皮细胞的最适盐浓度为40 mol·L-1 NaCl;在细胞水平和动物组织水平上,高盐处理的HMEC、小鼠胸主动脉原代内皮细胞和高盐诱导的高血压小鼠胸主动脉血管环上的内皮细胞中,TRPV4与cPLA2的空间偶联作用均明显增强。结论在细胞和组织水平上,高盐饮食能增强内皮细胞中TRPV4与cPLA2的空间偶联作用,这种空间偶联可能进一步引起两者的功能偶联,为血管内皮功能紊乱的研究提供了新的思路。
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