摘要目的 探讨 mTORC1/2 抑制剂 PP242 诱导多囊肾(polycystic kidney,PCK)大鼠胆管上皮细胞凋亡和自噬、抑制细胞增殖及胆管囊性扩张的分子机制.方法 免疫组织化学染色法检测PCK大鼠胆管上皮细胞中p-mTOR和p-Akt的表达;WST-1比色法检测雷帕霉素和PP242对胆管上皮细胞增殖活性的抑制作用,以及LC3、Beclin-1基因沉默和自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对细胞增殖的影响;蛋白免疫印迹法检测PP242 对PI3K/Akt信号通路相关蛋白、自噬标识蛋白 LC3 和 Beclin-1、 cleaved caspase-3表达的影响;流式细胞术和 ELISA 法检测 PP242对细胞凋亡的影响;免疫荧光染色法检测LC3 在细胞质中的表达情况;3D细胞培养检测Rictor基因沉默和雷帕霉素联用及雷帕霉素单独应用时对大鼠胆管上皮细胞成球能力的影响.结果 p-mTOR和 p-Akt在 PCK大鼠胆管上皮细 胞中呈过表达,PP242比雷帕霉素抑制胆管上皮细胞增殖效果更为明显,且呈浓度和时间依赖性改变(P<0.05);PP242明显抑制PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达;PP242 可诱导细胞凋亡和自噬,上调cleaved caspase-3、Beclin-1 和LC3-II/LC3-I比值. Rictor基因沉默和雷帕霉素联用比雷帕霉素单独应用对大鼠胆管上皮细胞的抑制作用更为明显;LC3、Beclin-1基因沉默和3-MA均可明显减弱PP242对细胞增殖的抑制作用(P <0.05).结论 PP242 可通过 PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制PCK大鼠胆管上皮细胞的增殖,其机制与细胞凋亡和自噬密切相关.