基于雌激素受体调节Nrf2-ARE通路的黄芩中抗氧化成分的筛选
Screening of antioxidant components in Scutellariae Radix through mediating Nrf2-ARE signaling pathway based on estrogen receptor
摘要目的 建立基于Nrf2-ARE通路的报告基因筛选模型,筛选黄芩中基于雌激素受体发挥抗氧化作用的活性成分.方法 ARE荧光素酶报告质粒pGL4.37和海肾荧光素酶报告质粒pRL-TK共同转染293T细胞.将黄芩中汉黄芩素、黄芩素、黄芩苷等3个主要活性成分和(或)雌激素受体(ER)特异性抑制剂加入Nrf2-ARE双荧光素酶报告基因系统,检测其是否通过ER影响Nrf2-ARE通路,发挥抗氧化作用.将筛选出的成分和(或)ER抑制剂、Nrf2-ARE通路抑制剂加入HaCaT细胞中,验证是否通过ER影响Nrf2-ARE通路发挥抗氧化作用.结果 黄芩苷(100 μmol·L-1)可明显激活293T细胞中的Nrf2-ARE通路,诱导表达倍数为空白组的(1.56+0.01)倍(P<0.01).预给予ER抑制剂后,诱导表达倍数下降至(1.02±0.23)倍,抗氧化作用消失.分别预给予ER抑制剂、Nrf2-ARE通路抑制剂后,黄芩苷干预UVB损伤的HaCaT细胞中的ROS值明显上升,SOD值明显下降.结论 黄芩苷可以通过ER影响Nrf2-ARE通路,发挥抗氧化作用.
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