NVP-BEZ235抑制肝癌细胞HepG2的增殖和迁移及机制研究
Inhibitory effect of NVP-BEZ235 on proliferation and migration of hepatocellular carcinoma cell HepG2 and its mechanism
摘要目的 探究NVP-BEZ235对肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响及其机制.方法 NVP-BEZ235(0、25、50、100、250、500 nmol·L-1)处理HepG2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对HepG2细胞增殖、凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell迁移实验,检测NVP-BEZ235对HepG2细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路、上皮-间质转化(EMT)以及Six1/Ezrin信号轴等标志物的表达情况;采用免疫荧光实验检测EMT相关标志物的表达情况.结果 NVP-BEZ235可明显抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;NVP-BEZ235可诱导HepG2细胞发生凋亡;NVP-BEZ235可抑制HepG2细胞的迁移能力.在NVP-BEZ235的作用下,p-AktSer473、p-S6Thr389、p-4E-BP1Thr37/46的表达下调,上皮标志物E-cadherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调,Six1和p-EzrinTyr353表达下调.结论NVP-BEZ235可有效抑制HepG2细胞的增殖和迁移,其机制可能与NVP-BEZ235降低p-AktSer473、p-S6Thr389、p-4E-BP1 Thr37/46的表达,抑制Six1/Ezrin信号轴及逆转EMT的进程有关.
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