换一批
换一批基于BiFC技术验证IMM-H004对CKLF1/CCR4结合的影响
Validation of effect of IMM-H004 on CKLF1/CCR4 combination based on BiFC
摘要目的 利用BiFC双分子荧光互补技术研究香豆素衍生物IMM-H004对趋化素样因子CKLF1与其受体CCR4结合的影响.方法 引入BiFC技术,将CKLF1趋化活性肽段C27与CCR4分别与Venus荧光蛋白的N端(VN173)和C端(VC155)相连,C27与CCR4的结合可以Venus黄色荧光的形式体现,重组载体共转染HEK293细胞,进行氧糖剥夺/复氧损伤造模,并给予0.1、1和10μmol·L-1 IMM-H004,观察活细胞中荧光强度.结果 通过测序比对验证CKLF1/CCR4-BiFC系统构建成功,并能转染HEK293细胞正常启动,在该系统中,与Control组相比,OGD/R造模后黄色荧光强度明显增加(P<0.01),给予不同浓度IMM-H004后荧光表达均明显降低(P<0.01),差异具有统计学意义.结论通过BiFC技术,在活细胞状态下直观观察到IMM-H004在脑缺血损伤模型中具有明显的神经保护作用,可拮抗氧糖剥夺/复氧损伤造模状态下CKLF1/CCR4的结合.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-1978.2020.07.025
发布时间
2020-07-10
基金项目
国家自然科学基金资助项目（81873026,81730096）；
重大专项（2018ZX09711001-003-005,2018ZX09711001-009-013）；
中国医学科学院医学与健康科技创新工程经费资助（2016-I2M-1-004）
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