换一批摘要目的 构建TDO2基因敲除的C57BL/6小鼠,初步研究其表型.方法 根据CRISPR/Cas9技术原理,设计并体外转录sgRNA,用显微注射法将Cas9、sgRNA同时注射到小鼠的受精卵.经胚胎移植,获得可能出现多种基因型并存的F0代小鼠.利用PCR法进行基因型判定,获得阳性F0代小鼠.由阳性F0代小鼠与野生型小鼠回交得到F 1代杂合子小鼠.阳性F 1代杂合子小鼠之间配繁,得到F2代纯合子小鼠.观察和分析纯合子小鼠的生长特性,繁殖能力和子代存活率.Western blot验证TDO2基因敲除纯合子小鼠肝脏组织中TDO2的蛋白表达.结果 成功繁育和鉴定出TDO2基因敲除小鼠,PCR法成功鉴别了子代鼠的基因型;Western blot结果表明,TDO2基因敲除小鼠的肝脏组织中TDO2蛋白不表达.TDO2基因敲除小鼠饮食、体质量等未发现异常改变.结论 成功建立TDO2基因敲除小鼠,为研究TDO2基因的生物学功能和在疾病中的调控作用提供实验手段.
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分类号
R-332（实验医学、医学实验）R322.47（基础医学人体形态学）R341.7（人体生物化学、分子生物学）R345.47（人体生物化学、分子生物学）R394.2（医学遗传学）R977.3（药品）R977.4（药品）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-1978.2021.05.024
发布时间
2021-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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