DNMT3A对高糖环境下小鼠心肌成纤维细胞增殖与迁移的影响

Effects of DNMT3 A on mouse cardiac fibroblast proliferation and migration under high glucose environment

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摘要目的探讨DNA甲基化转移酶3A(DNA methyltrans-ferases 3A,DNMT3A)在高糖环境下对小鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖与迁移的作用.方法取新生C57乳鼠心脏,剪碎后提取CFs,在显微镜下观察并鉴定形态.细胞贴壁后分别在低糖(5.5 mmol·L-1)培养基和高糖(33.0 mmol·L-1)培养基下培养,并使用DNMT3A慢病毒(沉默DNMT3A基因)处理.应用qRT-PCR方法检测DN-MT3A、α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原A1(CollagenⅠA1,Col1 A1)的mRNA表达变化;应用Western blot方法检测DNMT3A、α-SMA、Col1 A1的蛋白表达变化;CCK-8与MTT法检测CFs增殖活性;划痕实验与Transwell迁移实验检测CFs迁移能力.结果与低糖培养的对照组CFs相比,高糖环境诱导了CFs的DNMT3A表达水平升高与胶原纤维沉积,同时CFs的异常活化明显增强.使用慢病毒处理沉默高糖环境下CFs DN-MT3A表达后,与空载体组相比,沉默组DNMT3A表达下调,胶原纤维沉积减少,同时CFs的异常增殖与活化明显降低.结论沉默DNMT3A能抑制高糖诱导的胶原沉积与CFs异常活化增殖,DNMT3A通过刺激高糖环境下CFs异常活化与增殖导致糖尿病心肌纤维化和DCM的发生与发展.

作者孙赫 ^[1] 涂彬 ^[1] 宋凯 ^[1] 周洋 ^[1] 李锐 ^[2] 王娟 ^[3] 孙峰 ^[3] 沙纪名 ^[1] 徐盛松 ^[1] 张野 ^[2] 陶辉 ^[4] 学术成果认领

作者单位安徽医科大学第二附属医院心胸外科,安徽合肥 230601 ^[1] 安徽医科大学第二附属医院麻醉科,安徽合肥 230601 ^[2] 安徽医科大学药学院,安徽合肥 230032 ^[3] 安徽医科大学第二附属医院心胸外科,安徽合肥 230601;安徽医科大学第二附属医院麻醉科,安徽合肥 230601 ^[4]

关键词 DNMT3A 心肌成纤维细胞高糖增殖迁移糖尿病性心肌病

分类号 R-332 R322.11 R329.28 R587.2 R977.3

栏目名称

内分泌药理学

DOI 10.12360/CPB202112108

发布时间 2023-03-30