沉默ciRS-7通过靶向miR-944逆转胃癌细胞顺铂耐药性机制

Mechanism of ciRS-7 silencing to reverse cisplatin resistance in gastric cancer cells by targeting miR-944

二维码有效期 120s

摘要目的探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制.方法构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率、克隆形成实验检测克隆形成数,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,双荧光素酶实验验证ciRS-7与miR-944的靶向关系.结果 ciRS-7在顺铂耐药胃癌组织和细胞中高表达,miR-944在顺铂耐药胃癌组织和细胞中低表达,沉默ciRS-7明显降低顺铂处理的HGC-27/DDP细胞存活率、克隆形成数、cyclinD1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,明显增加顺铂处理的HGC-27/DDP细胞ciRS-7、凋亡率、凋亡指数、Bax、cleaved-caspase-3 蛋白表达水平,ciRS-7 靶向抑制 miR-944的表达.结论沉默ciRS-7可逆转胃癌细胞对顺铂的耐药性,其机制可能与沉默ciRS-7可促进miR-944的表达有关.