P3肽抑制RAW264.7巨噬细胞泡沫化的分子机制
Peptide P3 ameliorates foam cell formation in RAW264.7 cells and its molecular mechanisms
摘要目的 观察P3肽对RAW264.7巨噬细胞脂质沉积的影响,并探讨其作用机制.方法 采用MTT法筛选P3肽及氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)的作用浓度,并用80 mg·L-1的ox-LDL诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞;分别采用油红D染色和总胆固醇含量测定试剂盒,检测细胞内脂质沉积及总胆固醇含量;实时荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及 Western blot检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)、三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ATP-binding cassette transporter G1,ABCG1)的 mRNA 和蛋白表达变化;分别应用肝X受体(liver X receptor,LXR)的激动剂TO901317、GW3965,以及LXR抑制剂GSK2033进一步验证P3肽调控ABCA1、ABCG1表达的作用机制.结果 P3肽明显减少RAW264.7细胞内脂质沉积,降低细胞内总胆固醇含量,上调ABCA1、ABCG1mRNA和蛋白表达;P3肽上调AB-CA1、ABCG1 的作用与 LXR 激动剂 T0901317、GW3965 相似;加入抑制LXR基因转录的抑制剂GSK2033后,P3肽对ABCA1、ABCG1的基因表达无上调作用.结论 P3肽可减少RAW264.7巨噬细胞内脂质积聚,抑制泡沫细胞的形成,其作用机制可能与激活LXR-ABCA1/ABCG1通路有关.
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