骨髓间充质干细胞来源的外泌体抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩
Bone marrow mesenchymal stem cell-derived exosomes inhibit dexamethasone-induced C2C12 myotube atrophy
摘要目的 研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchy-mal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响.方法 (1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs.(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs.(3)C2C12细胞成肌分化.(4)将肌管细胞分为对照组(Control,2%马血清培养基培养48 h)、地塞米松组(DEX、浓度为10 μmol·L-1的DEX干预肌管48 h)、外泌体组(EXOs、外泌体干预肌管48 h)、外泌体抑制剂组(GW4869、10 μmol的GW4869干预BMSCs后提取的外泌体干预肌管48 h).48 h后测量各组肌管直径,CCK-8法检测各组细胞活力,Western blot检测各组肌肉萎缩及成肌分化相关蛋白的表达量.结果 BMSCs呈长梭形,BM-SCs-EXOs在透射电镜下为圆形的双层膜结构,直径约200 nm,且高表达CD9、CD63和CD81.相比于Control组,DEX组细胞活性降低(P<0.01),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和 MuRF-1(P<0.01)的表达明显上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低;相比于DEX组,BMSCs-EXOs组细胞活性升高(P<0.01),肌管细胞直径增加(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和 MuRF-1(P<0.01)的表达明显下调,MYOD(P<0.01)蛋白表达升高;相比于BMSCs-EXOs组,BMSCs-EXOs(GW4869)组细胞活性降低(P<0.05),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和 MuRF-1(P<0.05)的表达上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低.结论 骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BMSCs-EXOs)可抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩.
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