换一批ALKBH5介导NLRP3的m6A修饰促进心肌梗死小鼠心肌细胞焦亡
ALKBH5 mediated m6A modification of NLRP3 promotes cardiomyocytes pyroptosis in mice with myocardial infarction
摘要目的 N6-甲基腺苷修饰(N6-methyladenosine,m6A)去甲基化酶 ALKBH5 对心肌梗死(myocardial infarction,MI)小鼠心肌细胞焦亡的影响.方法 分别利用腺相关病毒敲低ALKBH5建立左冠状动脉前降支结扎手术的MI模型和采用小干扰RNA敲低目的基因的方法建立小鼠心肌细胞(HL-1)缺氧模型,观察ALKBH5对MI小鼠和缺氧HL-1细胞焦亡的影响.随后在细胞水平进行机制研究,通过RNA pull-down 和RNA免疫共沉淀(RIP)实验检测ALKBH5和阅读蛋白 IGF2BP2 与 NLRP3 mRNA 的相互结合,应用 MeRIP-qPCR方法测定ALKBH5对NLRP3的mRNA的m6A水平的影响.RNA稳定性实验检测ALKBH5和IGF2BP2对NLRP3 mRNA稳定性的影响.结果 体内和体外敲低ALKBH5均可抑制NLRP3炎性小体活化缓解MI小鼠和缺氧HL-1细胞的焦亡.机制上,结果显示在HL-1细胞中NLRP3 mRNA能够和ALKBH5蛋白相互结合;敲低ALKBH5可以增加NLRP3的m6A水平和降低NLRP3 mRNA稳定性;随后证实NLRP3 mRNA和IGF2BP2的蛋白相互结合;敲低IGF2BP2增加NL-RP3的mRNA稳定性.Rescue实验表明敲低IGF2BP2可以逆转敲低ALKBH5引起的NLRP3 mRNA表达的减少.结论 ALKBH5通过m6A修饰的方式介导NLRP3炎性小体活化参与MI小鼠的心肌细胞焦亡.
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关键词
心肌梗死NLRP3炎性小体ALKBH5m6A修饰IGF2BP2细胞焦亡myocardial infarctionNLRP3 inflamma-someALKBH5m6A modificationIGF2BP2pyrop-tosis
分类号
R-332（实验医学、医学实验）R329.24（基础医学人体形态学）R329.411（基础医学人体形态学）R342.2（人体生物化学、分子生物学）R364.5（病理学）R542.2（心脏、血管《循环系》疾病）
栏目名称
DOI
10.12360/CPB202408051
发布时间
2025-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（No82270287）
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