基于PGAM5/Drp1/PINK1/Parkin轴调控线粒体自噬探讨清解化攻方对急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用
The protective effect of Qingjie Huagong decoction on intestinal mucosal barrier of SAP rats based on regulation of mitochondrial autophagy by PGAM5/Drp1/PINK1/Parkin axis
摘要目的 探究清解化攻方对重症急性胰腺炎(severe a-cute pancreatitis,SAP)大鼠肠黏膜屏障保护作用的机制.方法 构建SAP大鼠模型,设立假手术组、模型组、不同剂量清解化攻方给药组和阳性对照组.HE染色观察组织病理学变化;ELISA法检测大鼠血清二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、D-乳酸(D-lactic acid,D-LA)水平;透射电镜观察回肠组织线粒体情况;qRT-PCR、Western blot分别检测大鼠回肠组织中 PGAM5、Drp1、PINK1、Parkin、LC3B mRNA 和蛋白的表达.结果 与假手术组相比,模型组大鼠胰腺和回肠组织出现明显病理改变,回肠组织线粒体结构异常、自噬小体数量减少;血清中DAO、D-LA含量上升(P<0.01);回肠组织中 PGAM5、Drp1、PINK1、Parkin、LC3B mRNA 和蛋白表达明显下降.与模型组相比,乌司他丁和清解化攻方各剂量组中的胰腺和回肠病理改善,回肠线粒体损伤减轻,自噬小体数量增多;血清中DAO、D-LA含量均有降低;回肠组织中PGAM5、Drp1、PINK1、Parkin、LC3B mRNA 和蛋白表达明显上升.结论 清解化攻方可能通过调控PGAM5/Drp1/PINK1/Parkin轴以提升肠上皮细胞线粒体自噬水平,从而改善肠上皮细胞的修复水平,发挥保护SAP肠黏膜屏障的效应.
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