摘要目的 建立一种化妆品皮肤致敏性评价的替代方法——基于掺入溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和流式细胞术(fow cytometry,FCM)的小鼠局部淋巴结试验方法(LLNA:Brdu-FCM),并对该方法进行评价.方法 (1)选择25％己基肉桂醛(HCA)作为阳性对照,丙酮∶橄榄油(4∶1,V/V,AOO)混合物作为溶剂对照进行试验:d 1、2、3涂抹小鼠双耳,d 5腹腔注射Brdu,d 6取双耳片和颌下淋巴结,流式细胞仪测定Brdu阳性细胞数,计算刺激指数(SI)是否≥3,以建立LLNA:Brdu-FCM试验方法.(2)选择OECD皮肤致敏性试验指导原则(No TG429)中15种已知致敏信息的参考化学品,通过盲法进行LLNA:Brdu-FCM试验,每种受试物用AOO、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)溶解后配制成3种不同浓度,同法进行检测,计算SI和EC2.7,判定受试物是否具有致敏性,将判定结果与OECD TG429比较,验证该方法的可靠性和准确性.结果 25％HCA的SI值为3.9,判断其致敏阳性,LLNA:Brdu-FCM试验方法可成功建立;9种受试物(2,4-二硝基氯苯、4-苯二胺、二氯化钴、2-氢巯基苯并噻唑、己基肉桂醛、丁香酚、苯甲酸苯酯、肉桂醇、咪唑烷基脲)为致敏阳性,6种受试物(甲基丙烯酸甲酯、氯苯、异丙醇、乳酸、水杨酸甲酯、水杨酸)为致敏阴性.该方法灵敏度为90％,特异性为100％,阳性预测率为100％,阴性预测率为83％,假阳性率为0,假阴性率为17％,准确度为93％,BrdU-FCM试验方法能够可靠地区分皮肤致敏剂和非致敏剂.结论 LLNA:Brdu-FCM能较好地评价化学物的致敏性,可在化妆品安全性评价中作为补充化妆品原料的皮肤致敏性安全检测的替代方法.