换一批基于UHPLC-Q-Orbitrap MS技术的仙鹤草干预H1299细胞增殖和凋亡的代谢组学分析
Metabolomic analysis of Agrimonia pilosa intervention in proliferation and apoptosis of H1299 cells based on UHPLC-Q-Orbitrap MS technology
摘要目的 采用非靶向代谢组学等方法,探讨仙鹤草(Agrimonia pilosa,AP)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)H1299细胞增殖、凋亡的影响及分子机制.方法 以H1299细胞为研究对象,通过CCK-8法、集落形成、LDH、Hoechst 33258染色、AO/EB染色、流式细胞检测、RT-qPCR等实验,检测AP对细胞的增殖和凋亡的作用.采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪(Ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-elec-trostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UH-PLC-Q-Orbitrap MS)进行代谢组学分析,检测主要差异代谢物,并分析其相关代谢通路.结果 与对照组相比,AP给药组能够明显抑制H1299细胞的增殖及集落形成,同时LDH的释放量增大,且呈剂量依赖性.荧光显微镜和流式细胞仪及RT-qPCR分析发现,AP给药后H1299细胞发生皱缩、核碎片增多现象,阻滞于G0/G1期,上调凋亡基因caspase-3、Bax,下调Bcl-2诱导细胞凋亡作用.代谢组学分析筛选出35 个差异代谢物,分别为 PC(O-30∶1)、D-Glutamic acid、PE(18∶0/15∶0)等,主要涉及代谢通路包括氨基酸代谢、甘油磷脂代谢和嘌呤代谢等.结论 AP可能通过干扰H1299细胞的多条代谢通路,抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,而发挥药理作用.
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关键词
仙鹤草H1299细胞代谢组学细胞凋亡非小细胞肺癌细胞增殖Agrimonia pilosaH1299 cellsmetabolo-micscell apoptosisNSCLCcell proliferation
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DOI
10.12360/CPB202407100
发布时间
2025-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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