摘要目的 采用有限酶切质谱法(limited proteolysis-small molecule mapping,LiP-SMap)药物靶点蛋白组学研究雪上一枝蒿甲素(bullatine A,BA)抗类风湿关节炎(rheumatoid ar-thritis,RA)作用靶点,为其临床应用治疗RA提供科学依据.方法LiP-SMap药物靶点蛋白组学鉴定BA的潜在干预靶点,进行生物信息学分析并验证.构建牛Ⅱ型胶原诱导的DBA/1 小鼠关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型,按临床评分平均分为CIA模型组、甲氨蝶呤阳性组(MTX组)、BA低剂量组(10 mg·kg-1)和BA高剂量组(20 mg·kg-1),药物干预后,关节指数评分和足厚度评价抗类风湿关节炎疗效;苏木精-伊红(HE)染色检测CIA小鼠关节炎病理损伤程度;酶联免疫吸附法检测CIA小鼠血清中炎症因子白细胞介素IL-17和总IgG、IgG3水平;流式细胞术检测胞内Th17 细胞(IL-17+CD4+T 细胞)和 Th1(IFN-γ+CD4+T 细胞)表达水平;荧光定量PCR法检测差异蛋白相关基因的表达.结果 药物靶点蛋白质组鉴定BA与Serpinb1a蛋白具有强结合性,且KEGG富集到IL-17信号通路.BA药物干预明显降低临床评分和足厚度,改善CIA小鼠局部关节炎的症状,减轻炎症细胞浸润(P＜0.05).差异蛋白验证结果显示,BA与Serpinb1a具有较强的亲和力(-5.92 kJ·mol-1),下调Serpinb1a mRNA的表达.BA药物干预减少CIA血清IL-17A水平,抑制脾淋巴细胞CD4+T细胞胞内IL-17A和IFN-γ细胞因子表达(P＜0.05),明显下调IL-17F转录表达(P＜0.05).结论BA具有显著抗胶原关节炎作用,其作用机制可能与调控Serpinb1a和IL-17信号通路有关.