血管内皮细胞特异性Traf2基因敲除小鼠的制备及鉴定
Establishment and genotype identification of vascular endothelial cell specific Traf2 gene knockout mouse
摘要目的 构建血管内皮细胞(endothelial cell,EC)特异性肿瘤坏死因子受体相关因子2(tumor necrosis factor receptor-associated factor 2,Traf2)基因敲除小鼠,为研究通过TRAF2调控血管EC活性致血管功能障碍相关疾病提供实验动物模型.方法 Cre-loxP系统构建血管EC特异性Traf2基因敲除(Traf2flox/flox Tek-iCre+)小鼠;PCR和凝胶电泳鉴定小鼠基因型;流式分离小鼠血管原代EC;Western blot和免疫荧光验证小鼠血管EC中Traf2敲除效果;HE染色检测小鼠血管及主要器官病理形态改变;基质胶成管检测小鼠血管原代EC成管能力.结果 敲除小鼠基因型符合要求;流式结果表明,成功分选出血管原代EC,敲除小鼠血管EC中TRAF2表达降低(P<0.01);组织学结果显示,敲除小鼠血管TRAF2表达降低,血管及主要器官形态无明显改变.基质胶成管表明模型小鼠血管原代EC成管能力下降.结论 成功构建血管EC特异性Traf2基因敲除小鼠,可为研究血管功能障碍相关疾病中TRAF2对血管EC的调控机制提供可靠的动物模型.
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