僵蚕不同极性萃取物体外抗胃癌前病变活性比较
Comparison of in vitro anti-precancerous lesions of gastric cancer activities of different polar extracts from Bombyx batryticatus
摘要目的 比较僵蚕(bombyx batryticatus,BB)不同极性萃取物体外抗胃癌前病变(precancerous lesions of gastric canc-er,PLGC)的活性差异.方法 BB经乙醇回流提取,不同极性有机溶剂萃取,得到石油醚(SYM)、乙酸乙酯(YSYZ)、正丁醇(ZDC)和水相(SX)4种萃取物.采用N-甲基-N'硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导GES-1细胞恶化构建PLGC细胞模型,CCK-8法筛选4种萃取物干预PLGC细胞的最佳浓度;平板克隆、划痕愈合和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭情况;Western blot 实验检测各组细胞 E-cadherin、Vimentin 及PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白的表达水平;采用UP-LC-Q-TOF-MS/MS技术对4种萃取物中化学成分进行分析.结果 与正常组相比,PLGC组细胞的增殖、迁移及侵袭能力均增强,E-cadherin蛋白表达水平下调,Vimentin、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平上调;与PLGC组相比,4种萃取物均能减弱PLGC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,下调Vi-mentin、p-PI3 K、p-AKT 及 p-mTOR 蛋白表达水平,SYM、YSYZ和ZDC萃取物干预后的PLGC细胞中E-cadherin蛋白表达水平均上调,SX组差异无统计学意义.此外,BB4种不同极性萃取物中化学成分存在明显差异,差异化合物为Cyste-ine、Histidine 等.结论 BB的4种不同极性萃取物均可通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制EMT过程发挥体外抗PLGC作用.其中,正丁醇萃取物活性最强,其次为乙酸乙酯和石油醚萃取物,水相活性最弱,其活性差异可能与其中差异化合物Cysteine、Histidine等相关.
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