摘要目的 基于转录组学探究阿霉素(doxorubicin,DOX)所致心肌细胞铁死亡中脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)的作用机制.方法 对阿霉素诱导的H9c2心肌细胞的RNA样本进行了二代测序(RNAseq),同时选取未处理H9c2细胞作为对照组.采用edgeR软件包对转录组数据进行差异表达分析,借助STRING数据库对差异基因进行蛋白互作分析(protein-protein interaction,PPI),并对差异基因Alox5、Alox15进行基因及蛋白水平验证.CCK-8法检测细胞凋亡率,用于筛选药物最佳浓度.应用Alox5抑制剂(Zileuton)、Alox15抑制剂(PD146176)对实验进行干预,将实验分为5组:Control、DOX、DOX+Fer-1、DOX+Zileuton、DOX+PD146176.流式细胞术检测各组凋亡情况.荧光显微镜及流式细胞仪FITC通道检测ROS水平.试剂盒法检测细胞内Fe2+、MDA、GSH、SOD含量.Western blot检测Alox5、Alox15、ACSL4、Ptgs2、GPX4 蛋白相对表达量.RT-qPCR 检测 Alox5、Alox15、ACSL4、Ptgs2、GPX4 mRNA相对表达量.ELISA检测培养上清液IL-6、TNF-α含量.结果 与空白对照组相比,阿霉素损伤模型组共有3 603个基因明显上调,1 378个基因明显下调.选取PPI互作关系较多的基因Alox5、Alox15做为目标基因.Western blot和RT-qPCR结果验证了阿霉素处理后,H9c2细胞内Alox5、Alox15表达水平明显上调,与RNAseq结果一致.抑制剂干预结果显示,Alox5、Alox15抑制剂可降低阿霉素引起的H9c2细胞死亡,降低阿霉素引起的H9c2细胞内ROS、Fe2+、MDA、ACSL4、Ptgs2、IL-6、TNF-α的表达升高并恢复细胞内GPX4、GSH、SOD水平.结论 阿霉素处理后的H9c2心肌细胞存在Alox5、Alox15过表达,Alox5、Alox15抑制剂可抑制阿霉素引起的心肌细胞铁死亡以及炎症反应.