3-甲基腺嘌呤对骨折后淋巴管清除率及骨折愈合的作用
Experimental study on effect of 3-methyladenine(3-MA)on lymphatic clearance rate and fracture healing
摘要目的 研究3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对小鼠下肢骨折后淋巴管清除率及骨折愈合的影响.方法 将C57BL/6雄性小鼠(8周龄)随机分为:雷帕霉素(rapamy-cin,RPM)组、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组、模型组(Model)和假手术组(Sham),每组各6只.RPM组、3-MA组、Model组建立左侧胫骨髓内固定骨折模型并连续给药14 d,Sham组仅切开皮肤.分别在1,7,14 d测量左侧后肢淋巴管清除率及组织肿胀率;14 d后通过micro-CT扫描、RUNX2免疫组化染色及藏红-固绿染色观察骨折部位变化情况.结果 ①在1,7,14 d,3-MA组淋巴管清除率低于Sham组、但高于RPM组及Model组.②在1,7,14 d,3-MA组组织肿胀率高于Sham组、但低于RPM组及Model组.③micro-CT扫描显示,在骨痂生成量(VOX-BV)、骨连接密度(Conn-Dens)、骨小梁数量(Tb.N)和骨小梁厚度(Tb.Th)等方面,3-MA组均高于Model组,RPM组则低于Model组;且3-MA组骨折线不明显;④免疫组化染色结果表明,3-MA组RUNX2表达量明显高于Model组和RPM组;而RPM组则低于Model组;各组之间阳性区域平均光密度(AOD)差异有统计学意义;⑤藏红-固绿染色结果显示,3-MA组的骨痂开始重塑,多余骨痂组织被吸收,软骨细胞减少,成骨细胞数量显著增加;而RPM组的骨折断端明显未愈合,软骨及骨小梁数量稀少.结论 3-MA能够提升骨折后的淋巴管清除率、减轻组织肿胀度、促进骨折愈合.
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