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基于杂交瘤技术的BTN2A1单克隆抗体制备及其特异性研究

Preparation and specificity study of BTN2A1 monoclonal antibodies based on hybridoma technology

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摘要目的探究靶向BTN2A1的单克隆抗体制备方法及其检测工具开发,为免疫治疗策略优化提供实验依据.方法采用杂交瘤技术筛选高亲和力BTN2A1单克隆抗体;通过流式细胞术验证抗体对天然构象抗原的特异性识别;运用竞争ELISA进行表位解析;基于抗体配对实验评估双抗夹心检测体系可行性.结果成功获得15株高亲和力BTN2A1单克隆抗体(最小半数有效浓度可达0.002 862 g·L-1),流式检测显示所有抗体均能在过表达BTN2A1的CHO细胞及Daudi肿瘤细胞系中高特异性识别细胞表面天然BTN2A1,并且抗体结合阳性率>95%.表位分析表明所有抗体均靶向同一表位.结论本研究成功制备了一组高亲和力BTN2A1单克隆抗体,成功制备了高亲和力BTN2A1单抗,为功能研究提供了工具.但这些抗体均识别同一表位,无法建立双抗夹心检测系统,因此需进一步开发针对不同表位的抗体组合,为优化BTN2A1免疫检测方法及治疗性抗体开发奠定了基础.

作者伍靳函 ^[1] 牛亚燕 ^[2] 蔡宁宁 ^[3] 吴妹英 ^[4] 学术成果认领

作者单位苏州大学研究生学院,江苏苏州 215006;苏州大学附属传染病医院 ^[1] 苏州市第五人民医院结核病科,江苏苏州 215131 ^[2] 苏州大学附属第一医院江苏省临床免疫研究所,江苏苏州 215000 ^[3] 苏州大学附属传染病医院;苏州市第五人民医院结核病科,江苏苏州 215131 ^[4]

关键词 Vγ9Vδ2T细胞 BTN2A1 单克隆抗体 T细胞抗体免疫 Vγ9Vδ2 T cells BTN2A1 monoclonal antibody T cells antibody immunity

分类号 R392.11（医学免疫学）R392.12（医学免疫学）

栏目名称

实验方法学

DOI 10.12360/CPB202505028

发布时间 2026-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）