换一批基因工程人丁酰胆碱酯酶的纯化及其在体外对琥珀酰胆碱的解毒作用
Purification of genetically engineered human butyrylcholinesterase and detoxification of succinylcholine in vitro
摘要目的开发丰富又安全的人丁酰胆碱酯酶来源,并检测其解毒效率.方法家蚕血淋巴液中重组人丁酰胆碱酯酶(rhBChE)的纯化采用批量硫酸铵分段分离和普鲁卡因酰胺-脂糖凝胶4B亲和层析技术.结果聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的rhBChE从血淋巴液中的总收率为66%,酶比活性达715 mmol*min-1*g-1蛋白.rhBChE在-20℃含20%甘油及0.02% NaN3的10 mmol*L-1磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中存放1年,酶活性无明显变化.18只小鼠ip事先与rhBChE孵温的1.5 LD的琥珀酰胆碱, 不出现任何中毒症状和体征,全部存活;而琥珀酰胆碱对照组,18只小鼠均剧烈抽搐并在2～5 min内窒息死亡.结论实验结果说明,从感染家蚕幼虫血淋巴液中纯化rhBChE的方法可靠,基因工程rhBChE在琥珀酰胆碱中毒危象的治疗中有潜在应用前景.
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关键词
丁酰胆碱酯酶蚕,家蚕琥珀酰胆碱色谱法,亲和butyrylcholinesterasesilkworms,Bombyx morisuccinylcholinechromatography,affinity
分类号
R963（药理学）
栏目名称
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
军队医药卫生科研项目（96-Z-016）
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