摘要目的 研究知母皂苷(SAaB)对淀粉样β蛋白片段25～35(Aβ25～35)激活巨噬细胞引起神经细胞凋亡的保护作用及有关的机制.方法 体外培养小鼠腹腔巨噬细胞24 h,加入 Aβ25～35(20 μmol·L-1),分别在加入 Aβ25～35 0.5, 1, 2和6 h取巨噬细胞,应用Western印迹方法检测不同时间点的胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和丝裂原活化蛋白激酶p38(P38mapk)的蛋白表达改变,确定ERK1/2和p38 MAPK蛋白表达达峰时间.然后,在加入 Aβ25～35前10 min,加入SAaB (10, 30和100 μmol·L-1)或在加入Aβ25～35前30 min,分别加入p38 MAPK的特异性阻断剂SB203580和ERK上游激酶MEK的特异性阻断剂PD98059,分别在Aβ25～35作用0.5 和2 h后,取细胞进行Western印迹实验.Aβ25～35作用48 h后,取培养的巨噬细胞上清液测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及一氧化氮(NO)生成量的改变,应用免疫细胞化学染色观察巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(Inos)的表达.为了观察SAaB对Aβ25～35激活巨噬细胞所介导的神经细胞凋亡的保护作用,在巨噬细胞培养液内加入SAaB(10, 30和100 μmol·L-1) 作用10 min,然后加入Aβ25～35(20 μmol·L-1)作用48 h 后,将培养的上清液转移到体外培养8 d的小脑颗粒细胞内作用72 h,对照组将未被Aβ25～35刺激的巨噬细胞上清液加入到神经细胞内.应用Hoechst 33258染色观察小脑颗粒细胞凋亡改变.结果 Aβ25～35(20 μmol·L-1)可使巨噬细胞磷酸化ERK1/2和磷酸化p38 MAPK表达明显增加,分别在加入Aβ25～35后0.5 h和2 h作用达高峰.另外,Aβ25～35也可使巨噬细胞的TNF-α和NO产生增加以及Inos表达增加,Aβ25～35引起的巨噬细胞TNF-α产生增加是通过ERK1/2信号通路激活介导的,因为MEK的特异性阻断剂PD98059可明显抑制Aβ25～35引起的巨噬细胞TNF-α产生增加.将Aβ25～35刺激48 h的巨噬细胞上清液加入到培养的小脑颗粒细胞内,可使神经细胞凋亡百分比较对照组明显增加.SAaB(30和 100 μmol·L-1)能明显抑制Aβ25～35引起的巨噬细胞磷酸化ERK1/2、磷酸化p38 MAPK和Inos表达增加,SAaB (10, 30和100 μmol·L-1)也能对抗Aβ25～35引起的TNF-α和NO的生成增加及明显降低由Aβ25～35激活巨噬细胞所介导的神经细胞凋亡.结论 SAaB对Aβ25～35激活巨噬细胞引起神经细胞凋亡具有对抗作用,该作用与其抑制巨噬细胞的ERK1/2信号转导通路,进而抑制巨噬细胞TNF-α和NO的产生有关.