换一批
换一批利用化学蛋白组学方法分析小鼠肝中氨甲蝶呤相互作用蛋白质
Identification of methotrexate interacting proteins in the mouse liver by chemical proteomics approach based on affinity chromatography
摘要目的 利用基于亲和色谱的化学蛋白组学方法分析小鼠肝组织匀浆液中与氨甲蝶呤相互作用蛋白,探讨氨甲蝶呤的作用机制.方法 以键合氨甲蝶呤的琼脂糖凝胶作为亲和材料,从小鼠肝组织匀浆液中亲和富集与氨甲蝶呤相互作用蛋白,采用含有吐温-20的缓冲液洗涤凝胶,去除凝胶表面非特异吸附蛋白,采用高浓度盐洗脱凝胶亲和富集蛋白,对洗脱蛋白进行胰蛋白酶酶解,酶解产物进行HPLC/MS分析和数据库搜索.结果 对洗脱样品进行SDS-PAGE分析结果表明键合氨甲蝶呤的琼脂糖凝胶可以富集小鼠肝组织中与氨甲蝶呤相互作用蛋白.对洗脱样品酶解产物进行质谱分析鉴定了同型半胱氨酸水解酶等23种蛋白.结论 基于亲和色谱的化学蛋白组学方法是一种快速、有效的发现药物相互作用蛋白的方法.
更多相关知识
- 浏览492
- 被引2
- 下载17
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
