摘要目的：考察基于核酸的酶联桥接分析（ELBA）法定量分析生物基质中双链 siRNA 药物的反义链RNA 的可行性，为研究 siRNA 药物提供可靠的检测方法。方法在 LNCap 细胞空白基质中采用 ELBA 方法建立 siRNA 反义链的标准曲线（5~50000 pmol·L-1）。LNCap 细胞中转染双链 siRNA（终浓度100 nmol·L-1），24 h 后取上清、细胞裂解物及 RNA 诱导沉默复合体（RlSC），根据标准曲线对各组分中反义链 RNA 浓度进行定量。分别配制含双链 siRNA 5~25000 pmol·L-1或反义 siRNA 5~25000 pmol·L-1的小鼠全血浆样品，用小鼠肝、心、肾和脾生物基质配制反义 siRNA 3~6250 pmol·L-1样品，考察 ELBA 方法对血浆和生物基质中 siRNA 反义链进行定量的特异性和定量范围。sc 给予 C57小鼠 LNCap 细胞制备移植瘤模型，iv 给予双链 siRNA 药物15 nmol·kg-1，30 min 后 ELBA 法测定血浆、肿瘤组织、肝、肾、心和脾中反义链siRNA 浓度。结果基于 ELBA 方法对细胞基质中反义链 siRNA 定量范围为5~50000 pmol·L-1，且ELBA可以对转染双链 siRNA 的细胞裂解物和 RlSC 复合物中的反义链 siRNA 进行特异定量。ELBA 对血浆中双链 siRNA 中的反义链无响应，对血浆和组织中 siRNA 反义链的定量分析范围分别为5~25000 pmol·L-1和3~3125 pmol·L-1。双链 siRNA 在前列腺特异膜抗原-适配子递送系统下静脉给药30 min 后，ELBA 检测发现，反义链 RNA 分布丰度依次为肿瘤组织、肝、肾、血和脾。结论 ELBA 方法可用于 siRNA 药物的反义链的定量分析及组织分布研究。