摘要目的：研究附子对H9c2心肌细胞的线粒体毒性作用与机制。方法附子水提取物6.25，12.5，25，50和100 g · L-1作用于H9c2细胞24 h，荧光染色和CCK-8法检测细胞存活率；附子水提取物6.25，12.5和25 g·L-1作用于H9c2细胞24 h，流式细胞仪检测线粒体膜电位和活性氧（ROS）生成的变化；使用相应的荧光探针，结合激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+、线粒体内Ca2+以及线粒体内超氧化物水平的变化；萤火虫荧光素法检测细胞内ATP浓度变化；实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖活化受体共激活因子-1α（Pgc-1α），Bcl-2和Bax mRNA的表达；Western蛋白印迹法检测Pgc-1α蛋白的表达。结果附子水提取物12.5~100 g·L-1作用于H9c2细胞，可显著抑制细胞活性（P<0.05），IC50值为47.4669 g·L-1，95%的可信限32.5997~69.1145 g·L-1。附子水提取物25 g·L-1处理后，ROS的荧光强度由正常对照组的204±67升高到454±78（P<0.05），线粒体超氧化物的荧光强度由5.4±1.8升高到26.8±8.5（P<0.01），线粒体膜电位由1.7±0.5下降到0.8±0.4（P<0.05），线粒体内Ca2+的荧光强度由38.0±4.3下降到9.2±1.6（P<0.01），细胞内Ca2+的荧光强度由7.8±0.8升高到22.1±0.5（P<0.05），细胞内ATP浓度由（10.6±0.4）μmol·g-1下降到（5.3±1.1）μmol·g-1蛋白（P<0.05）。实时荧光定量PCR和Western蛋白印迹检测结果显示，与正常对照组相比，附子水提取物25 g·L-1组Pgc-1α和Bcl-2的mRNA表达分别由正常对照组的1.00±0.10和1.00±0.10下降到0.09±0.06（P<0.01）和0.43±0.06（P<0.01），Bax mRNA表达由1.00±0.03升高到1.17±0.06（P<0.05）；Pgc-1α蛋白表达由正常对照组的0.906±0.034下降到0.541±0.003（P<0.01）。结论附子对心肌细胞具有一定的线粒体毒性，其作用是多种途径共同作用的结果。附子的心肌线粒体毒性可能是附子造成心肌毒性的原因。