换一批依托泊苷诱导的人小肠类器官衰老模型的构建及鉴定
Construction and identification of a human small intestinal organoid aging model induced by etoposide
摘要目的 用依托泊苷(etoposide)诱导类器官发生DNA损伤构建人小肠类器官衰老模型.方法 临床活检小肠组织,体外无菌分离获得小肠隐窝,在培养基中培养成为类器官.类器官用依托泊苷10μmol·L-1处理7 d,倒置相差显微镜观察类器官表面形态变化,Western印迹法检测DNA损伤标志物磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)水平;衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性染色检测类器官SA-β-gal阳性细胞面积百分率,Western印迹法检测衰老标志物p 16 I N K 4 A蛋白表达水平.结果 人小肠隐窝体外成功培养成球.依托泊苷诱导的人小肠类器官衰老模型表面皱缩,类器官部分死亡,整体表面积变小;类器官中γH2AX蛋白表达显著上调(P<0.01);SA-β-gal阳性细胞面积百分率显著增加(P<0.01),约90％细胞呈SA-β-gal阳性;p16INK4A蛋白表达显著增加(P<0.01).结论 依托泊苷处理可诱导人小肠类器官发生DNA损伤,从而诱导人小肠类器官衰老.
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分类号
R965.1（药理学）
栏目名称
DOI
10.3867/j.issn.1000-3002.2023.03.005
发布时间
2023-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
北京市自然科学基金（5182002）
国家自然科学基金（82072717）
北京市新星交叉课题（Z191100001119020）
北京市属高校高水平教师队伍建设支持计划（CIT&TCD201904077）
北京市自然科学基金（M23003）
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